Сдам Сам

ПОЛЕЗНОЕ


КАТЕГОРИИ







Дослід 2. Вплив жовчі на активність ліпази.





Принцип методу. Активність ліпази оцінюють за утворенням у результаті гідролізу жиру жирних кислот, кількість яких визначають титруванням лугом у присутності фенолфталеїну. Гідроліз жирів найзручніше спостерігати на прикладі витяжки з підшлункової залози (джерело ліпази) і молока як субстрату, жир якого знаходиться в емульгованому стані і швидко розщеплюється на гліцерин і жирні кислоти. Якщо в пробу долити жовч, то ліпаза активується і гідроліз жиру протікає швидше.

Матеріальне забезпечення: панкреатин, молоко кип’ячене і попередньо розведене 1:1, жовч, 0,5 % спиртовий розчин фенолфталеїну, 0,05 н NaOH, водяна баня або термостат, мікробюретки, піпетки.

Хід роботи. У дві пробірки або колбочки наливають по 10 мл молока та по 0,5 мл панкреатину. В одну пробірку доливають 1 мл води, а в другу – 1 мл жовчі. Вміст пробірок добре перемішують. З кожної пробірки відбирають по 1 мл суміші в інші пробірки, додають 1-2 краплі 0,5 % розчину фенолфталеїну і відразу ж титрують 0,05 н розчином натрію гідроксиду до появи слаборожевого забарвлення, яке не зникає протягом 30 секунд. Потім ці пробірки із залишком суміші вміщують у водяну баню або термостат при 37 С. Через кожні 10-15 хв з них відбирають по 1 мл суміші і проводять титрування, як і попереднього разу. Роблять 4-5 таких визначень. Результати виражають в мл розчину лугу, який затрачається на титрування.

Отримані дані вносять в таблицю і будують криву, відкладаючи по осі абсцис час у хв, а по осі ординат – кількість NаОН в мл, який пішов на титрування.

 

Умови досліду 0 хв 15 хв 30 хв 45 хв 60 хв
Кількість NаОН, мл
Ліпаза, активована жовчю          
Ліпаза без жовчі          

Клініко-діагностичне значення. Перетравлювання ліпідів відбувається в основному в кишечнику під дією активної панкреатичної ліпази, тому що в шлунковому соку ліпаза малоактивна і діє тільки на емульгований жир, наприклад молока для кращого перетравлювання. Ліпіди мають бути емульговані. Головним емульгатором ліпідів є жовч. Оскільки жовч емульгує жири, при додаванні жовчі ліпаза активується і гідроліз жирів відбувається з більшою швидкістю. Так як ліпаза є основним ензимом для перетравлення ліпідів, зміни її активності можуть свідчити про порушення певних ланок ліпідного обміну. Дефіцит панкреатичної ліпази викликає панкреатогенну стеаторею, яку спостерігають при хронічному панкреатиті, спадковій гіпоплазії pancreas, спадковому чи набутому дефіциті панкреатичної ліпази, а також при муковісцидозі. Вміст жовчних пігментів у калі при таких станах супроводжується зниженням вмісту вільних жирних кислот і значним приростом нерозщеплених жирів. Порушення емульгування, травлення і всмоктування ліпідів та жиророзчинних вітамінів можуть спричинятися також захворюваннями печінки, жовчного міхура або жовчних шляхів (жовчокам’яна хвороба).

Контроль виконання лабораторної роботи

1. У чому полягає принцип методу визначення фосфоліпідів у сироватці крові?

A. В осадженні фосфоліпідів трихлорацетатною кислотою і визначенні вмісту фосфору

B. В утворенні комплексної сполуки за присутності ацетатного ангідриду і суміші ацетатної і сульфатної кислот

C. В утворенні синього забарвлення з 2,6-дихлорфеноліндофенолом і відновленні аскорбіновою кислотою

D. В утворенні з 2-тіобарбітуровою кислотою забарвленого триметинового комплексу

E. В утворенні забарвлених продуктів з оксиметилфурфуролом

 

2. Вказати вміст загальних фосфоліпідів за умов норми:

А. 1,52-3,62 г/л

В. 0,25-1,25 г/л

С. 3,75-5,40 г/л

Д. 10,15-12,30 г/л

Е. 9,80-15,72 г/л

 

3. При лабораторному обстеженні у хворого виявили стеаторею. Вкажіть фермент, недостатність дії якого призвела до виникнення цього симптому?

А. Ліпаза

В. Пепсин

С. Лактаза

Д. Амілаза

Е. Хімотрипсин

 

4. Людина тривалий час обмежує вживання продуктів, що містять фосфоліпіди. До яких метаболічних порушень це може призвести?

 

5. При аналізі сироватки крові людини знайдено 5 ммоль/л загального холестеролу, 3,2 ммоль/л фосфоліпідів, 1,5 ммоль/л тригліцеридів. Чи відповідають ці показники нормі? Як називається такий стан і коли він буває?

 

6. Концентрація фосфоліпідів у крові становить 0,7 г/л. Як називається такий стан і про які метаболічні порушення свідчить?

 

Приклади тестів „Крок-1”

1. Потерпілий від укусу гадюки ледь не помер внаслідок інтенсивного гемолізу. Аналіз крові показав незвично високий вміст лізолецитину. Токсичний ефект був обумовлений наявністю у зміїній отруті:


А. Фосфоліпази А1

В. Фосфоліпази А2

С. Фосфоліпази С

Д. Фосфоліпази Д

Е. Нейрамінідази

 

2. У хворих на цукровий діабет спостерігається підвищення вмісту вільних жирних кислот. Причиною цього може бути:

А. Накопичення в цитозолі пальмітоїл-КоА

В. Активація утилізації кетонових тіл

С. Активація синтезу аполіпопротеїнів А1, А2, А4

Д. Зниження активності фосфатидилхолінхолестеринацилтрансферази плазми крові

Е. Підвищення активності тригліцеридліпази

 

3. При лабораторному обстеженні крові хворого, взятої натще, виявлено, що сироватка має білуватий колір, вміст загальних ліпідів – 20 г/л, холестеролу – 9 мМ/л. Після центрифугування сироватки на поверхні утворюється біла плівка, що дозволяє припустити збільшення в крові хіломікронів. Зниження активності якого ферменту може спричинити таке явище?

А. Ліпази підшлункової залози

В. Панкреатичних фосфоліпаз

С. Лецитинхолестерол-ацилтрансферази

Д. Ліпази жирової тканини

Е. Ліпопротеїнліпази крові

 

4. Внаслідок тривалого вживання жирної їжі у хворого розвинулася аліментарна гіперліпемія, яка головним чином може бути наслідком підвищення вмісту:

А. Фосфоліпідів

В. Холестеролу

С. Гліколіпідів

Д. Хіломікронів

Е. Тригліцеридів

 

5. Після прийому жирної їжі у хворого з’являються нудота та печія, має місце стеаторея. Причиною такого стану може бути:

А. Недостатність амілази

В. Підвищення виділення ліпази

С. Порушення синтезу фосфоліпази

Д. Порушення синтезу трипсину

Е. Недостатність жовчних кислот

Індивідуальна самостійна робота студентів

1. Метаболізм сфінголіпідів в нормі та при патології; клінічне значення, порушення обміну сфінголіпідів.

 

Література

Основна:

1. Губський Ю. І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С.72-85, 190-194, 209-216.

2. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С.213-228, 348-365, 378-381, 382-384.

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С.276-291, 305-309.

4. Біологічна хімія. Тести та ситуаційні задачі. / За ред. О.Я. Склярова. – Київ: Медицина, 2010. – С.87-106.

5. Клінічна біохімія. / За ред. проф. Склярова О.Я. – Львів, 2006. – С.63-79.

6. Біохімічні показники в нормі і при патології. Довідник / За ред. Склярова О.Я. – Київ: Медицина, 2007. – С.102-111.

Додаткова:

1. Асинова М.И., Белая И.И. Липидный обмен и социальная адаптация человека при старении // Клин. геронтология. – 2001. – № 7. – С. 18-22.

2. Красильников О.А. Роль ионов Са в реализации быстрых эффектов L-тироксина на обмен фосфоинозитидов в клетках печени крыс / Биохимия. – 2003. – Т. 68, № 7. – С. 946-953.

 

Тема № 6. β-Окиснення та біосинтез жирних кислот. Дослідження обміну жирних кислот та кетонових тіл.

Мета заняття: Вивчити процеси біосинтезу та окиснення жирних кислот. Знати метаболізм кетонових тіл в нормі та при патології і вміти визначати їх вміст у сечі.

Актуальність теми: Окиснення ліпідів та метаболізм кетонових тіл є важливою складовою метаболізму, що забезпечує організм людини резервами метаболічного палива у вигляді енергії АТФ. Визначення вмісту кетонових тіл в крові та сечі має важливе значення для діагностики ряду патологічних процесів.

Конкретні завдання:

Ø Трактувати β-окиснення вищих жирних кислот.

Ø Трактувати біосинтез вищих жирних кислот та регуляцію процесу біосинтезу на рівні ацетил-КоА-карбоксилази та на рівні синтетази жирних кислот.

Ø Аналізувати метаболізм кетонових тіл.

Ø Пояснювати механізми надмірного зростання вмісту кетонових тіл при цукровому діабеті та голодуванні.

 

Теоретичні питання

1. β-Окиснення вищих жирних кислот:

· локалізація процесу β-окиснення жирних кислот;

1. активація жирних кислот. Роль карнітину в транспорті жирних кислот в мітохондрії;

2. послідовність ферментативних реакцій β-окиснення жирних кислот;

3. енергетика β-окиснення жирних кислот.

2. Механізм окиснення гліцеролу, енергетика цього процесу.

3. Біосинтез вищих жирних кислот:

· локалізація біосинтезу вищих жирних кислот;

· метаболічні джерела синтезу жирних кислот;

· стадії синтезу насичених жирних кислот;

· характеристика синтетази ВЖК, значення ацилтранспортуючого білка, біотину;

· джерела НАДФН, необхідного для біосинтезу жирних кислот;

· послідовність ферментативних реакцій біосинтезу вищих жирних кислот;

· регуляція процесу біосинтезу на рівні ацетил-КоА-карбоксилази та на рівні синтетази жирних кислот;

· елонгація насичених жирних кислот;

· утворення ненасичених жирних кислот.

4. Метаболізм кетонових тіл:

· ферментативні реакції біосинтезу кетонових тіл;

· реакції утилізації кетонових тіл, енергетичне значення;

· метаболізм кетонових тіл в умовах патології. Механізми надмірного зростання вмісту кетонових тіл при цукровому діабеті та голодуванні;

· поняття – кетоацидоз, кетонемія, кетонурія.

 

Практична робота

 







Что будет с Землей, если ось ее сместится на 6666 км? Что будет с Землей? - задался я вопросом...

Что вызывает тренды на фондовых и товарных рынках Объяснение теории грузового поезда Первые 17 лет моих рыночных исследований сводились к попыткам вычис­лить, когда этот...

Что делать, если нет взаимности? А теперь спустимся с небес на землю. Приземлились? Продолжаем разговор...

Конфликты в семейной жизни. Как это изменить? Редкий брак и взаимоотношения существуют без конфликтов и напряженности. Через это проходят все...





Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:


©2015- 2024 zdamsam.ru Размещенные материалы защищены законодательством РФ.