Сдам Сам

ПОЛЕЗНОЕ


КАТЕГОРИИ







ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ





 

Цель исследования - изучение гепатопротективной и желчегонной активности новых производных левопимаровой кислоты на экспериментальной модели острого гепатита, вызванного четыреххлористым углеродом.

Ранее была установлена высокая гепатопротекторная активность тритерпеноидов (производные бетулиновой и глицирризиновой кислот) [11].

Актуальность проведенного исследования обосновывается следующим: левопимаровая кислота относится к дитерепеноидам, поэтому с целью поиска веществ с гепатопротекторной и желчегонной активностью в лаборатории биоорганической химии катализа Уфимского Института химии РАН были получены новые производные левопимаровой кислоты и изучение их гепатопротективной и желчегонной активности выступает важным и актуальным.

Материалы исследования (рис. 3.1):

Производные левопимаровой кислоты:

- (5R,9R,13S,18S)-20-изопропил-5,9-диметил-17 {[(4метилфенил)сульфонил]имино}-14оксопентацикло[10.6.2.01,10.04,9.013,18]икоза-15,19-диен-5-карбоновая кислоты (I)

- диметил (4bS,8R)-2-изопропил-3’,4b,8-триметил-2’,4’-диоксо-4,4а,4b,5,6,7,8,8a,9,10-декагидро-3Н-спиро[3,10a-этанофенантрен-11,5’-[1,3]-тиазолиден]-8,12-дикарбоксилата (II)

- натриевая соль 1-гидроксихинопимаровой кислоты (III)

Рис. 3.1 – Структурные формулы производных левопимаровой кислоты

 

Для наркотизирования животных использовали уретан в дозе 1г/кг внутрибрюшинно.

Ход эксперимента:

Экспериментальные исследования гепатопротекторных и желчегонных свойств новых производных левопимаровой кислоты (I-III) проведены в соответствии с Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (2012 г.) [19]. Для изучения гепатопротекторных и желчегонных свойств производных левопимаровой кислоты (I-III) была использована модель острого токсического гепатита, вызванного CCl4. Предварительно животные были поделены на 6 групп из 8 животных.



Токсический гепатит моделировали внутрибрюшинным введением 0,04 мл 50% масляного раствора CCl4 на 100 г массы животного, однократно в течение 3 суток. Изучаемые соединения и препарат сравнения Карсил (Carsil, Софарма АО, Болгария) вводили перорально по лечебно-профилактической схеме: однократно в дозе 50 мг/кг в течение 5 дней до воспроизведения гепатита и 10 дней после, начиная с первого дня введения гепатотоксина (всего 15 дней). Интактным животным и группе негативного контроля (не леченные) вводили внутрижелудочно эквиобъемные количества дистиллированной воды.

Уровень билирубина и маркерных ферментов печени (аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартамаминотрансферазы (АСТ)) определяли в сыворотке крови с помощью реактивов фирмы "Lachema" (Чешская Республика). Желчегонную активность оценивали по скорости секреции и общему количеству выделенной за 3 часа желчи [3]. О степени выраженности воспалительных процессов в печени судили по отношению массы печени к массе тела. Статистическую обработку полученных результатов проводили по [4], при Р˂0,05 вероятность различий считали достоверной.

Приведем полученные результаты исследования.

Введение CCl4 приводит к цитолизу гепатоцитов и нарушению функциональной активности печени, что сопровождается повышением уровня маркерных трансаминаз и билирубина в крови, а также снижению ее желчеобразовательной и желчегонной активности. [4]. Все изучаемые соединения увеличивали общее количество и скорость секреции желчи по сравнению с контролем (гепатит). В группе животных, которым вводили соединения (I) и (III) общее количество желчи, выделившейся за 3 ч, было выше на 46 и 38% соответственно по сравнению с группой контроля и было на уровне группы интактных животных (Р˃0,05, табл. 3.1).

 

Таблица 3.1 Влияние производных левопимаровой кислоты (50 мг/кг) на желчегонную активность и относительную массу печени у крыс на фоне острого токсического гепатита, вызванного CCl4 (M±m; n=6)

Группа Скорость секреции желчи, мг/мин на 100 г массы Общее количество желчи, мг на 100 г Относительная масса печени, мг/ 100 г
1-ый ч 2-ой ч 3-ий ч
Интактные 5,7±1,14 3,7±0,20 4,8±2,33 846,2±165,6 3,0±0,002
CCl4-гепатит 5,85±1,40 3,6±1,17 2,3±0,2 603,4±48,4 3,5±0,12

Продолжение таблицы 3.1

Cоединение I 5,8±1,79 3,1±0,48 4,9±2,26 885,3±46,4[3] 3,2±0,11
Соединение II 5,4±0,29 4,3±0,54[4] 3,3±0,97 773,3±62,1 3,3±0,10[5]
СоединениеIII 5,2±1,64 4,6±1,01[6] 4,0±0,74 833,2±66,8 3,4±0,11[7]
Карсил 7,3±2,31[8] 5,9±0,47[9] 3,2±0,53 957,1±39,0 3,1±0,13[10]

 

Соединения I и II понижали уровни ферментов трансаминаз по сравнению с контролем. Так, уровень АЛТ в этих группах был снижен на 31 и 28% (Р˂0,001), а уровень АСТ на 17 и 24% соответственно. Соединение (III) не оказывало влияния на уровень АЛТ и незначительно снижало уровень АСТ по сравнению с группой контроля (табл. 3.2).

 

Таблица 3.2 Влияние производных левопимаровой кислоты (50 мг/кг) на биохимические показатели крови у крыс на фоне острого токсического гепатита, вызванного CCl4 (M±m; n = 6)

Группа Билирубин, мкмоль/л АЛТ, мккат/л АСТ, мккат/л Коэффициент де Ритиса (АСТ/АЛТ)
Интактные 6,9±1,10 0,043±0,002 0,048±0,003 1,10±0,2
CCl4-гепатит 18,2±1,38 0,070±0,005 0,054±0,002 0,77±0,05
Cоединение I 15,2±0,82 0,048±0,002[11] 0,045±0,004[12] 0,90±0,03[13]
Cоединение II 19,5±3,39 0,050±0,009[14] 0,041±0,002[15] 0,82±0,01
Cоединение III 13,6±1,01[16] 0,072±0,002 0,049±0,002[17] 0,69±0,05
Карсил 6,2±4,36[18] 0,057±0,004[19] 0,047±0,002[20] 0,87±0,03

Цитолитический синдром при острых поражениях печени сопровождается более выраженным повышением активности АЛТ по сравнению с активностью АСТ [5]. Соотношение показателей активности АСТ/АЛТ (коэффициент де Ритиса) у интактных животных (1,1±0,2) снижалось на фоне гепатита (0,77±0,98), что свидетельствует об остром характере воспаления. Введение соединений I и II повышало коэффициент де Ритиса, по сравнению с группой нелеченного контроля (Табл. 2). В группе соединения I коэффициент де Ритиса был близок к таковому у интактных животных.

Уровень билирубина во всех группах изучаемых соединений I-III оставался высоким, по сравнению с группами карсила и интактных животных, но был незначительно ниже, чем в группе контроля (Табл. 3.2). Относительная масса печени во всех группах была выше, по сравнению с интактным контролем, что косвенно свидетельствовало о течении воспалительных процессов в органе (Табл. 3.1).

Выводы по проведенному исследованию:

1.Проведено изучение гепатопротекторной и желчегонной активности новых производных левопимаровой кислоты на модели острого токсического гепатита у крыс.

2. Производные левопимаровой кислоты понижают уровень ферментов трансаминаз на модели острого гепатита и не влияют на уровень билирубина

3. Соединения I и III повышают общее количество выделенной желчи по сравнению с нелеченными животными

4. Среди изученных новых производных левопимаровой кислоты, наибольшей желчегонной и гепатопротекторной активностью обладает соединение I.

 

Заключение

На протяжении всей своей жизни человек контактирует с огромным количеством химических соединений, в т.ч. токсическими. При этом одним из наиболее часто поражаемых токсинами органов является печень, поскольку именно она осуществляет основные метаболические и биотрансформационные процессы.

Острые и хронические заболевания печени, вызываемые различными ксенобиотиками, называются токсическими гепатитами [15, c. 23].

Спектр веществ, приводящих к развитию токсических гепатитов, достаточно широк. Это химические соединения, используемые в промышленности и сельском хозяйстве (галогенорганические, фосфороорганические, производные бензола и др.), и различные группы лекарственных средств (противотуберкулезные препараты, нестероидные противовоспалительные средства, антибиотики и т.д.), в том числе и алкоголь.

Лекарственные препараты в 40% случаев являются причиной развития гепатитов у пациентов старше 40 лет, а алкогольные гепатиты составляют 60-70 % от всех токсических повреждений печени.

Исследование новых веществ, которые проявляют высокую гепатопротективную и желчегонную активность выступает актуальным для терапии болезней печени и ЖВП, а также перспективным направлением медицинских экспериментов.

Глобальное изменение экологии, увеличение потребления лекарственных средств и продуктов питания с химическими добавками приводит к росту ксенобиотической нагрузки на здоровье человека, что способствует увеличению заболеваний печени. Известно о высокой гепатопротекторной активности терпеноидов (производные бетулиновой и глицирризиновой кислот). Левопимаровая кислота относится к дитерпеноидам. В выпускной квалификацонной работе нами были изучены гепатопротективная и желчегонная активность следующих производных левопимаровой кислоты:

Производные левопимаровой кислоты:

- (5R,9R,13S,18S)-20-изопропил-5,9-диметил-17 {[(4метилфенил)сульфонил]имино}-14оксопентацикло[10.6.2.01,10.04,9.013,18]икоза-15,19-диен-5-карбоновая кислоты (I)

- диметил (4bS,8R)-2-изопропил-3’,4b,8-триметил-2’,4’-диоксо-4,4а,4b,5,6,7,8,8a,9,10-декагидро-3Н-спиро[3,10a-этанофенантрен-11,5’-[1,3]-тиазолиден]-8,12-дикарбоксилата (II)

- натриевая соль 1-гидроксихинопимаровой кислоты (III).

Введение CCl4 приводит к цитолизу гепатоцитов и нарушению функциональной активности печени, что сопровождается повышением уровня маркерных трансаминаз и билирубина в крови, а также снижению ее желчеобразовательной и желчегонной активности. Все изучаемые производные левопимаровой кислоты увеличивали общее количество и скорость секреции желчи по сравнению с контролем (гепатит). В группе животных, которым вводили соединения (I) и (III) общее количество желчи, выделившейся за 3 ч, было выше на 46 и 38% соответственно по сравнению с группой контроля и было на уровне группы интактных животных (Р˃0,05).

Соединения I и II понижали уровни ферментов трансаминаз по сравнению с контролем. Так, уровень АЛТ в этих группах был снижен на 31 и 28% (Р˂0,001), а уровень АСТ на 17 и 24% соответственно. Соединение (III) не оказывало влияния на уровень АЛТ и незначительно снижало уровень АСТ по сравнению с группой контроля.

ВЫВОДЫ

 

1. Производные левопимаровой кислоты понижают уровень ферментов трансаминаз на модели острого гепатита и не влияют на уровень билирубина.

2. Производные левопимаровой кислоты: (5R,9R,13S,18S)-20-изопропил-5,9-диметил-17 {[(4метилфенил)сульфонил]имино}-14оксопентацикло[10.6.2.01,10.04,9.013,18]икоза-15,19-диен-5-карбоновая кислоты и натриевая соль 1-гидроксихинопимаровой кислоты повышают общее количество выделенной желчи по сравнению с интактными животными.

3. Среди изученных новых производных левопимаровой кислоты, наибольшей желчегонной и гепатопротекторной активностью обладает соединение I - (5R,9R,13S,18S)-20-изопропил-5,9-диметил-17 {[(4метилфенил)сульфонил]имино}-14оксопентацикло[10.6.2.01,10.04,9.013,18]икоза-15,19-диен-5-карбоновая кислоты.

 

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Агаркова Е.В. Применение Эссливера форте в комплексной терапии заболеваний гепатобилиарной зоны // Российский медицинский журнал, 2008. Т.10, №2, с.68-71.

2. Альперович Б.И. «Хирургия печени» - М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2010. - 352 с.

3. Беленький Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. М.Л. Беленький. Л., 1963, - 151 с.

4. Белякин С.А., Бобров А.Н., Плюснин C.B., Хазанов А.И. Доля умерших пациентов трудоспособного возраста в различных этиологических группах цирроза печени // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2009г.- № 3. - (приложение 33 - Тезисы 14-й Российской конференции «Гепатология сегодня» 16-18.03.09). - С.6.

5. Белякин С.А., Бобров А.Н., Плюснин C.B., Хазанов А.И. Сравнительные данные об этиологии циррозов печени с благоприятными и неблагоприятными исходами// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. -2009г. - № 3. – с.8.

6. Березин И.В., Савин Ю.В. «Основы биохимии» - М.: Изд-во МГУ, 1990. - 298 с.

7. Болкунов А.В., Долгих М.П., Толстикова Т.Г., Чернов С.В. «Новые лекарственные средства. Успехи и перспективы»: Материалы 54-го Всероссийского Научного Семинара и Молодежной Научной школы. «Химия и медицина», Уфа, 2005. –184 с.

8. Буеверов А.О. Место гепатопротекторов в лечении заболеваний печени // Болезни органов пищеварения. 2001. № 1. С. 16–18.

9. Вафина Г.Ф., Кузьмич Р.В., Галин Ф.З., Юнусов М.С. Новые замещенные амиды, тио- и карбамиды каркасных производных хинопимаровой кислоты. // Ж. орг. химии. – 2013. – Т.49(12). – С. 1816-1820.

10. Ворожцов Н. Н., Мамаев В. П. Получение ацетил-п-бензохинона и некоторых его производных. // Сборник статей по общей химии. – 1953. – Т.1. – С.533-537.

11. Гайворонский И.В., Ничипорук Г.И. Анатомия и физиология человека, Учебник для средних професс.учебных заведений, изд-во «Академия , 2-е изд., 2007. - 492 с.

12. Галин Ф. З.,Флехтер О. Б., Третьякова Е. В.Синтез и превращения диеновых аддуктов смоляных кислот //Химия и компьютерное моделирование. Бутлеровские сообщения. 2004. Т.5. №2.

13. Дубовицкий С.Н., Ильина К.Л., Сапожникова Т.А., Хисамутдинова Р.Ю., Габдрахманова С.Ф., Макара Н.С., Комиссарова Н.Г., Басченко Н.Ж., Юнусов М.С. Изучение гепатозащитного и желчегонного действия дималеата бетулина. Тезисы докладов XI Всероссийской конференции «Химия и медицина», с молодежной научной школой по органической химии, Уфа, Россия, 4-8 июня 2013. - с. 174.

14. Забокрицкий Н. А «Острые и токсические заболевания печени - одна из важных проблем современной клинической медицины и фармакологии»// Электронный научно-образовательный вестник здоровье и образование в XXI в.,- 2016, т.17, №3, стр. 8-19.

15. Зайко Н.Н., Быць Ю.В., Атаман А.В. и др. «Патологическая физиология» Учебник для студентов медицинских вузов., К.: "Логос", 1996., - 568 с.

16. Залидов И. П. Энциклопедия медицинских препаратов. – м.: Проспект, 2015 – 2380 с.

17. Иваников И.О., Сюткин В.Е., Говорун В.М. «Общая гепатология», М.: «МАКС Пресс», - 2002 . – 112 с.

18. Изучение гепатозащитных и желчегонных свойств никотиноилолеаноловой кислоты. Юнусов М.С., Казакова О.Б., Зарудий Ф.С., Медведева Н.И., Хисамутдинова Р.Ю. , Габдрахманова С.Ф. //VIII Всероссийская конференция с международным участием. Уфа, 6-8 апреля 2010, - С. 195.

19. Кильметова И.Р., Толмачев П.В., Струнин Б.П., Габдрахманова С.Ф., Макара Н.С. Влияние копозиции "ДАВС-25+ПОЛИЗОН" на функциональное состояниепечени// Ве стник ветеренарии, т.60, №1, 2012, С. 70-72.

20. Лерман Б.М., Галин Ф.З., Уманская Л.И., Толстиков Г.А. Синтезы монофункциональных каркасных соединений. // Ж. орг. химии. – 1978. – Т.14(12). – С. 2536-2540.

21. Машковский М.Д. «Лекарственные средства» пособие для врачей. 15-е изд. М.: ООО «Новая волна».- 2005. - 1200 с.

22. Мубаракшина О.А. Гепатопротекторы: сравнительная характеристика и аспекты клинического использования // Медицинский вестник, 2008, № 34.

23. Никитин И.Г. Гепатопротекторы: мифы и реальные возможности // Фарматека, 2007, т.147, №13,с. 14-18.

24. Новиков В.Е., Климкина Е.И. Фармакология гепатопротекторов// Клиническая фармакология, 2005, т.4, №1.

25. Обзо лекарственных препаратов – гепатопротекторов. – Электронный ресурс. – Режим доступа с экрана: http://zdravotvet.ru/obzor-lekarstv-dlya-pecheni-luchshie-tabletki-gepatoprotektory/

26. Оковитый С.В. Клиническая фармакология гепатопротекторов // Практик. 2002. – №3

27. Подымова С.Д. «Болезни печени», изд.: «Медицина», №4 , 2005. –768 с.

28. Рощина Н.Н. , Верещагин А.Л. «Физиологическая активность терпенов кедровой живицы», Бийский технологический институт (филиал) ГОУ ВПО «Алтайский государственный технический университет им. И.И. Ползунова» 2015, с. 325-328.

29. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ: под общ. ред. В.П. Фисенко. – М.: ЗАО «ИИА «Ремедиум», 2000. – 360 с.

30. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств, под ред. Миронова А.Н. Часть первая. – М.: Гриф и К. – 2013. – 944 с.

31. Садовникова И.И. «Циррозы печени. Вопросы этиологии, патогенеза, клиники, диагностики, лечения»// Российский медицинский журнал, 2003., т.5., № 2

32. Семенов, А.А. Очерк химии природных соединений // Нсб.: «Наука», СИФ РАН, 2000. - 664 с.

33. Сергеева С.А., Озерова И.Н. Сравнительный анализ фосфолипидного состава препаратов Эссенциале форте и Эссливер форте // «Фармация», 2001 г. № 3., с. 32-33.

34. Справочник по фармакологии. – Электронный ресурс. – Режим доступа с экрана: http://www.spravocnikpolekarstvam.ru

35. Ткач С.М. Эффективность и безопасность гепатопротекторов с точки зрения доказательной медицины // Здоровье Украины, 2009. – №6 – С. 7–10.

36. Толстиков Г.А.,. Толстикова Т.Г., Щульц Э.Э., Толстиков С.Е., Хвостов М. В. «Смоляные кислоты хвойных России. Химия, фармаколгия» Новосибирск: изд. «ГЕО» 2011, с. 330-333

37. Толстиков Г.А., Щульц Э.Э., Чернов С.В., Толстикова Т.Г., Сорокина И.В., Шакиров М.М., Маматюк В.И. «Азотистые гетероциклы и алкалоиды» М.: «Иридиум-Пресс», 2001 , т. 1, стр. 139-146.

38. Флехтер О. Б.«Синтез производных бетулина, глицирретовой и левопимаровой кислот, обладающих противовирусной, гепатопротекторной и противоязвенной активностью»: дисс. д.х.н.. Уфа, 2007.- 418 с.

39. Флехтер О. Б., Смирнова И. Е., Третьякова Е.В., Толстиков Г.А., Савинова О.Г., Бореко Е.И. //Биоорганическая химия,2009,т. 35, №3, стр. 424

40. Христенко Н. Е., Ананько С. Я. Гепатопротекторы - путь к улучшению жизни //Академия Естествознания., 2012, №1, стр. 63-64

41. Чудов И. В. Фармакологические свойства производных смоляных кислот, монометилового эфира кетотетрракарбоновой кислоты и их применение в животноводстве: Дисс. на соискание д.б.н. Казань. 2014

42. Шахгильдян И.В., Ясинский А.А., Михайлов М.И. и соавт. Эпидемиологическая характеристика хронических гепатитов В и С в Российской Федерации. // Мир вирусных гепатитов. 2008. - Т. 5. - С. 11-16.

43. Шерлок Ш., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей. М. Изд.: « Медицина», 1999. – 864 с.

44. Шульпекова Ю.О.Лекарственные поражения печени //Consilium medicum. 2006. - № 7. - С. 5-9.

45. Ющук Н.Д., Климова Е.А., Знойко О.О. и др., Протокол диагностики и лечения больных вирусными гепатитами В и С. // РЖГГК. -2010.-Т. 20, №6.-С. 4-60.

46. Яковенко А.В., Яковенко Э.П. Цирроз печени: вопросы терапии // Consilium medicum. - 2006. ,т. 8., № 7. , с. 28 - 36.

 


[1] а -концентрация билирубина, приведенная на этикетке с реактивом 5

[2] Измерение: длина волны 580-620 нм, кювета 1 см, температура +15 до +25 оС

[3] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[4] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[5] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[6] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[7] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[8] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[9] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[10] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[11] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[12] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[13] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[14] д достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.остоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[15] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[16] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[17] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[18] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[19] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.

[20] достоверно относительно группы CCl4-гепатит при Р<0,05; n - количество животных в группах.









Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:


©2015- 2019 zdamsam.ru Размещенные материалы защищены законодательством РФ.