|
|
ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ ВИРУСОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ДИАГНОСТИКИ. ⇐ ПредыдущаяСтр 6 из 6 КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ВИРУСОВ СТРОЕНИЕ КУРИНОГО ЭМБРИОНА. Обозначьте на рисунке основные структурные элементы куриного эмбриона.
Феномены, позволяющие выявить вирус в курином эмбрионе.
1_________________________________________________________________
2_________________________________________________________________
3_________________________________________________________________
4_________________________________________________________________
КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК.
1. ПЕРВИЧНО-ТРИПСИНИЗИРОВАННЫЕ -фибробласты куриного эмбриона (ФК), фибробласты эмбриона человека (ФЭЧ), клетки почки эмбриона человека и т.д. 2. ПОЛУПЕРЕВИВАЕМЫЕ -получают из легкого или мышечной ткани эмбриона человека. 3. ПЕРЕВИВАЕМЫЕ -HeLa (карцинома шейки матки), НЕр-2 (карцинома гортани человека), BHK-21 (почки хомячка) и др. КОНТРОЛЬНЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ ПРИ РАБОТЕ С КУЛЬТУРАМИ КЛЕТОК 1. Бактериологический контроль; 2. Контроль на вирусологическую стерильность; 3. Цитогенетический контроль (количественная и качественная характеристика хромосомного аппарата).
ФЕНОМЕНЫ, ПОЗВОЛЯЮЩИЕ ВЫЯВИТЬ ВИРУС В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК I. ЦПЭ (ЦПД) - цитопатический эффект (действие). Нормальные клетки HeLa ФЭЧ Цитопатическое действие:
II. Цветная проба Солка. Принцип метода: рост культуры клеток в питательной среде сопровождается накоплением кислых продуктов метаболизма и изменением рН, что визуально проявляется изменением цвета индикатора. При размножении ряда вирусов клетки погибают, накопления продуктов метаболизма и изменения цвета индикатора не происходит.
III. Феномен гемадсорбции.
IV. Образование бляшек (феномен Дюльбекко).
V. Феномен интерференции. Принцип метода: феномен интерференции используют для обнаружения вирусов, не дающих отчетливого ЦПД вкультуре клеток. Культуру клеток заражают исследуемым материалом и затем вносят индикаторный вирус (ВВС - вирус везикулярного стоматита). При наличии в исследуемом материале вируса ЦПД индикаторного вируса будет отсутствовать (клетка «занята» искомым вирусом), что оценивается визуально при малом увеличении микроскопа. VI. Метод флюоресцирующих антител. Принцип метода:______________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИНФЕКЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ ВИРУСОВ (ТИТРОВАНИЕ). I этап. Разведение вируссодержащего материала в питательной среде или физиологическом растворе. II этап. Мерный перенос материала из разведений в: - пробирки с культурой клеток; - в куриный.эмбрион; - в организм животного; - добавление эритроцитов или других ингредиентов. III этап. Учет результатов: титр вируса – максимальное разведение вируссодержащёго материала, в котором еще наблюдается ожидаемый феномен (ЦПД, РГА, гибель животного и т.д.). Титр соответствует 1 единице. Титрование необходимо для выбора рабочей дозы вируса, которая вдальнейшем будет использоваться для постановки иммунологических реакций с целью идентификации вируса.
ОБЩАЯ СХЕМА ИДЕНТИФИКАЦИИ (СЕРОТИПИРОВАНИЯ) ВЫДЕЛЕННОГО ВИРУСА.
I этап. Выделенный вирус в рабочей дозе + диагностическая противовирусная сыворотка в рабочем разведении → контакт при комнатной температуре или при 37 градусах в течение 1 часа. II этап. Перенос смеси выделенного вируса с сывороткой в: - культуру клеток; - в организм животного; - вкуриный эмбрион; - добавление эритроцитов или других ингредиентов. III этап. Учет результатов (время определяется избранной моделью для выделения и идентификации вируса я особенностями вируса). Вид (тип) выделенного вируса определяют в соответствии с нейтрализующим эффектом одной из типоспецифических сывороток, т.е. с отсутствием феномена взаимодействия вируса с культурой клеток там, где сыворотка соответствует виду (типу) выделенного вируса. ЭТИОЛОГИЯ ОРВИ
  ЧТО ПРОИСХОДИТ, КОГДА МЫ ССОРИМСЯ Не понимая различий, существующих между мужчинами и женщинами, очень легко довести дело до ссоры...  Система охраняемых территорий в США Изучение особо охраняемых природных территорий(ООПТ) США представляет особый интерес по многим причинам...  ЧТО И КАК ПИСАЛИ О МОДЕ В ЖУРНАЛАХ НАЧАЛА XX ВЕКА Первый номер журнала «Аполлон» за 1909 г. начинался, по сути, с программного заявления редакции журнала...  Что способствует осуществлению желаний? Стопроцентная, непоколебимая уверенность в своем... Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:
|
