Сдам Сам

ПОЛЕЗНОЕ


КАТЕГОРИИ







Правила микроскопии. Ошибки при работе с микроскопом. Уход за микроскопом





Порядок работы Ошибки при работе
1. С помощью зеркала установить освещение    
2. На препарат нанести каплю иммерсионного масла и поместить стекло на предметный столик, укрепив зажимами Капля масла должна быть оптимального объема: слишком большая растечется в слой, маленькая – не позволит добиться четкого изображения
3. Повернуть револьвер до отметки иммерсионного объектива х90  
4. Под контролем зрения сбоку медленно погрузить иммерсионный объектив в каплю масла, пока объектив не соприкоснется со стеклом Работая быстро и не контролируя работу сбоку, можно объективом раздавить стекло

 

Окончание табл. 26

 

Порядок работы Ошибки при работе
5. Глядя в окуляр, медленно вращать макровинт на себя, пока не промелькнет изображение препарата Вращая макровинт быстро, можно не заметить изображение препарата
6. Провести окончательную фокусировку препарата микровинтом, вращая его в пределах одного оборота Нельзя допускать соприкосновения объектива с препаратом, т.к. это может повлечь поломку стекла или фронтальной линзы
7. По окончании работы необходимо удалить масло с объектива, прикасаясь к нему салфеткой Не тереть! Засохшее масло на салфетке может поцарапать линзу
8. Револьвер поставить в нейтральное положение, на предметный столик положить салфетку и опустить тубус В результате нарушения этих пунктов может быть сорвана резьба, по которой поднимается и опускается тубус, и микроскоп будет выведен из строя
9. Микроскоп переносят двумя руками: одной держат за тубус, другой придерживают микроскоп снизу!

 

 

Таблица 27

Техника приготовления препаратов

Последовательность действий
1. На стекло петлей нанести каплю воды, внести в нее культуру и растереть, чтобы получить тонкий и равномерный мазок. Диаметр мазка должен быть равен 1 см
2. Высушить на воздухе
3. Зафиксировать: предметное стекло мазком вверх 3 раза провести над пламенем горелки
4. Окрасить

 

 

Таблица 28

Методы окраски мазков

Простые Сложные
Используется один краситель: фуксин, Бурри Используется несколько красителей: Грама, Ожешки, Нейссера, Циля – Нильсена, Бурри – Гинса

 

 

Таблица 29

Приготовление препаратов для изучения бактерий

В живом состоянии

Метод «раздавленной» капли Метод «висячей» капли
1. На поверхность обезжиренного стекла нанести суспензию бактерий и накрыть покровным стеклом. 2. Микроскопировать препарат с объективом х40 1. В центр покровного стекла нанести суспензию бактерий 2. Предметное стекло с лункой, края которой смазаны твердым вазелином, прижать к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки 3. Быстрым движением перевернуть препарат покровным стеклом вверх, капля должна висеть над лункой, не касаясь ее дна или края 4. С оъективом х8 найти край капли 5. С объективом х40 изучать препарат

 

 

Таблица 30

Окраска по методу Бурри

Последовательность действий
1. На стекло петлей нанести каплю спиртового раствора туши
2. Внести туда культуру и растереть
3. Высушить
4. Не фиксировать!
5. Микроскопировать с объективом х40
На черном или сером фоне видны неокрашенные клетки бактерий

 

 

Таблица 31

Окраска по методу Грама

Последовательность действий Время
1. На мазок нанести бумажку, пропитанную раствором генцианвиолетта   1-2 мин
2. Нанести раствор Люголя 1-2 мин
3. Нанести этиловый спирт 30-60 с
4. Промыть водой  
5. Нанести бумажку, пропитанную раствором фуксина 1-2 мин
6. Промыть водой  
7. Высушить и микроскопировать с объективом х90  
Грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет, грамотрицательные – в розовый

 

Таблица 32

Обнаружение капсул по методу Бурри – Гинса

Последовательность действий Время
1. На стекло нанести каплю раствора туши, внести туда культуру и равномерно распределить по стеклу  
2. Высушить  
3. Зафиксировать над пламенем спиртовки  
4. Нанести водный раствор фуксина 1-2мин
5. Промыть водой, высушить  
6. Микроскопировать с объективом х90  
Бактерии окрашиваются в красный цвет, неокрашенные капсулы контрастно выделяются на черно-розовом фоне

 

Таблица 33

Окраска кислотоустойчивых бактерий по методу

Циля – Нильсена

Последовательность действий Время
1. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина через полоску фильтровальной бумаги, подогреть до появления паров   3-5 мин
2. Снять бумагу, промыть водой  
3. Опустить мазок в стаканчик с 5% серной кислотой для обесцвечивания 5 с
4. Промыть водой  
5. Нанести водный раствор метиленового синего 3-5 мин
6. Промыть водой, высушить  
7. Микроскопировать с объективом х90  
Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет, некислотоустойчивые – в голубой

 

Таблица 34

Окраска спор по методу Ожешки

Последовательность действий Время
1. На нефиксированный мазок нанести 0,5% раствор хлороводородной кислоты и подогреть на пламени   2-3 мин
2. Кислоту слить, препарат остудить, промыть водой  
3. Просушить и зафиксировать над пламенем  
4. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина через полоску фильтровальной бумаги, подогреть до появления паров   3-5 мин
5. Снять бумагу, промыть водой  
6. Опустить мазок в стаканчик с 5% серной кислотой для обесцвечивания 5 с
7. Промыть водой  
8. Нанести водный раствор метиленового синего 3-5 мин
9. Промыть водой, высушить  
10. Микроскопировать с объективом х90  
Споры окрашиваются в розовый цвет, вегетативные клетки – в голубой

 

 

Таблица 35

Окраска зерен волютина по методу Нейссера

Последовательность действий Время
1. На фиксированный мазок нанести ацетат синьки Нейссера   2-3 мин
2. Нанести раствор Люголя 10-30 с
3. Промыть водой  
4. Нанести водный раствор везувина или хризоидина 0,5-1 мин
5. Промыть водой, высушить  
6. Микроскопировать с объективом х90  
Зерна волютина окрашиваются в темно-синий цвет, цитоплазма клеток – в желтый

 

 

Таблица 36

Окраска спирохет по методу Романовского – Гимзы

Последовательность действий Время
1. На фиксированный мазок нанести рабочий раствор красителя (смесь метиленового синего, эозина и азура; 2 капли красителя на 1 мл дистиллированной воды)     10-20 мин
2. Промыть водой, высушить на воздухе  
3. Микроскопировать с объективом х90  
Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый цвет, боррелии – в сине-фиолетовый, лептоспиры – в розово-сиреневыйх

____________________

х – лептоспиры окрашиваются с большим трудом.

 

 

Таблица 37

Окраска риккетсий по методу Здродовского

Последовательность действий Время
1. Нанести фуксин Циля 5 мин
2. Промыть водой  
3. Нанести раствор 0,01% хлороводородной кислоты 30 с
4. Промыть водой  
5. Нанести раствор метиленового синего 1 мин
6. Промыть водой, высушить  
7. Микроскопировать с объективом х90  
Риккетсии окрашиваются в красный цвет, цитоплазма клеток, в которых они паразитируют, – в голубой, ядра – в синий

 

 

ФИЗИОЛОГИЯ БОЛЕЗНЕТВОРНЫХ БАКТЕРИЙ

 

Физиология бактерий изучает их жизнедеятельность, процессы питания, обмена, дыхания, роста, размножения и взаимодействия с окружающей средой.

Таблица 38

Химический состав бактерий

Вода Химические элементы (15-25%) х
Органогены Макроэле-менты Микроэле-менты
75-85% Необходима: 1) для рас-творения химических соединений, 2) для осуществления реакций метаболизма Углерод Азот Водород Кислород Фосфор Калий Натрий Сера Магний Кальций Хлор Железо Марганец Цинк Молибден Бор Хром Кобальт
Биополимерыхх
Нуклеиновые кислоты Белки Липиды Углеводы
10% - РНК (функция: биосинтез белка), 3-4% - ДНК (наследственность) 50-75% большинство из них ферменты, токсины, струк-турные белки Жирные кислоты Нейтральные жиры, воск Фосфолипиды Гликолипиды (входят в состав ЦПМ и КС)ххх Моносахариды Олигосахариды Полисахариды

________________

х - обнаруживаются в золе после сжигания, входят в состав биополимеров;

хх – процентный состав приводится на сухую массу клетки;

ххх – ЦПМ – цитоплазматическая мембрана, КС – клеточная стенка.

Таблица 39







Конфликты в семейной жизни. Как это изменить? Редкий брак и взаимоотношения существуют без конфликтов и напряженности. Через это проходят все...

Живите по правилу: МАЛО ЛИ ЧТО НА СВЕТЕ СУЩЕСТВУЕТ? Я неслучайно подчеркиваю, что место в голове ограничено, а информации вокруг много, и что ваше право...

Что способствует осуществлению желаний? Стопроцентная, непоколебимая уверенность в своем...

ЧТО И КАК ПИСАЛИ О МОДЕ В ЖУРНАЛАХ НАЧАЛА XX ВЕКА Первый номер журнала «Аполлон» за 1909 г. начинался, по сути, с программного заявления редакции журнала...





Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:


©2015- 2024 zdamsam.ru Размещенные материалы защищены законодательством РФ.