ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ НЕСПОРООБРАЗУЮЩИЕ БАКТЕРИИ

Рожа свиней — септическое антропозоонозное инфекционное заболевание, характеризующееся геморрагическим гастроэнтеритом, нефритом, кровоизлияниями на серозных и слизистых оболочках, увеличением селезенки. При несвоевременной запоздалой диагностике и принятии мер, многие животные погибают.

Возбудитель рожи свиней открыт Пастером в 1882 г. Его обнаруживают у свиней, мышей, ягнят, телят, индеек, уток, рыб, а также человека.

Морфология и тинкториальные свойства. Е. rhusiopathiae — полиморфная, короткая палочка размером 0,2…0,3x0,5…1,5 мкм, располагается одиночно и цепочками. Неподвижна. Спор и капсул не образует (рис.110).

По данным электроноскопических исследований, в лизирующейся клетке видны протоспоры. Бактерии размножаются перешнуровыванием с образованием гетероморфных клеток. В старых культурах, а также в мазках из разращений эндокарда, из мозговых оболочек Е. rhusiopathiae образует длинные, извилистые нити или клубки. В мазках из почек, печени, селезенки бактерии располагаются одиночно, парно или небольшими гнездами. Обнаруживают также и фагоцитированные бактерии.

Микроб хорошо окрашивается обычными анилиновыми красками, грамположительный (см. рис 8 на цветной вкладке).

Культивирование. Е. rhusiopathiae — микроаэрофил. Неприхотлив к питательным средам. Культивируется на ПМБ, МПА, МПЖ, молоке, полужидком агаре (МПБ с 0,05…0,15% агара), кровяной сыворотке, средах с углеводами, элективной среде Сент-Иваньи (агаровая среда, содержащая 0,1 % кристаллвиолета и 1 % азида натрия). Рост на питательных средах с рН 7,2…7,6 наблюдается при оптимальной температуре 37°С уже через сутки в аэробных и микроаэрофильных условиях. На бульоне появляется слабое помутнение, незначительный сероватый осадок; на агаре колонии мелкие, нежные, прозрачные в виде капелек росы; на желатине при посеве уколом через 6…10 дней от серовато-белого стержня отходят горизонтальные, нежные, бахромчатые отростки, напоминающие собой форму ламповой щетки. Желатин не разжижает.

Биохимические свойства. Микроб ферментирует с образованием кислоты лактозу, глюкозу, левулёзу, галактозу, в слабой степени ксилозу, а иногда арабинозу, мальтозу и рамнозу.

Патогенность. Рожистая бактерия широко распространена в животном мире. В естественных условиях патогенна для свиней, ягнят, индеек, кур, уток, голубей. Ее встречают у ворон, воробьев, дроф, фламинго и других птиц, у тюленей, дельфинов, а также у иксодовых клещей и млекопитающих зоопарка — белок, пятнистых оленей. Для речных и морских рыб рожистая бактерия является сапрофитом. К рожистой бактерии восприимчив и человек, у которого наблюдается эрисипелоид в форме местного (чаще на ладонях, кистях рук, суставах запястья) серозного воспаления кожи с расширением лимфатических ходов без некроза. К экспериментальному подкожному заражению восприимчивы особенно белые мыши и голуби, которые гибнут спустя 2…5 дней, менее чувствительны кролики, которые после внутривенного заражения гибнут через 3…6 дней.

Устойчивость. Несмотря на то, что Е. rhusiopathiae не образует спор, она весьма устойчива к внешним воздействиям. Жизнеспособность ее в жидких средах в запаянных ампулах сохраняется до 17…35 лет, в загнившем трупном материале — месяцами, в речной воде — до 73 дней, моче — до 203, фекалиях — до 94, в почвенной взвеси — до 108 дней. Высушивание выдерживает до трех недель.

Однако нагревание убивает рожистую бактерию уже при 50 °С через 15 мин, а при 70 °С — через 5 мин. Но при варке толстых кусков мяса бактерия гибнет лишь через 2,5 ч. Переживает в течение зимы. Жарение и тушение не стерилизуют мясо от рожистой бактерии. Бактерию находили в копченой свинине через 90, а в солонине — через 170 дней после изготовления. Обычные дезинфицирующие растворы эффективны. Чувствительна к УФ-лучам.

Антигенная структура. Рожистая бактерия содержит два антигена: термолабильный групповой и термостабильный видовой. На основании серологических исследований (реакции преципитации, агглютинации, гемагглютинации) установлено два серовара. Серовар А для свиней более вирулентен, а серовар В менее вирулентен. Серовар А выделяется в культурах от больных рожей свиней наиболее часто (до 95 %). Общим видовым является антиген N.

Иммунитет. Переболевшие рожей свиньи приобретают стойкий и длительный иммунитет. До трех месячного возраста животные болеют редко, по достижении 12-ти месячного возраста – становятся иммунными.

Патогенез. Возбудитель рожи проникает в организм животного различными путями. При пероральном заражении бактерии первоначально оседают в миндалинах и солитарных фолликулах кишечника, а при заражении через кожные царапины — в лимфатических щелях пораженного участка, вокруг которого возникает местный воспалительный процесс. Через несколько дней микробы преодолевают защитные барьеры, проникают в кровь, размножаются в ней и распространяются по организму. Септический процесс вызывает лихорадочную реакцию, нарушение тканевого обмена, дистрофические и некротические изменения в паренхиматозных органах и сердечно-сосудистой системе, что ведет к образованию тромбов, отеков и к летальному исходу.

При хорошо выраженной реактивности животного организм оказывает действенную защиту против возбудителя, который своими агрессинами тормозит в начале заболевания противодействие лейкоцитов и макрофагов РЭС, и, хотя они фагоцитируют микробов, лизиса последних не наступает (незавершенный фагоцитоз). С появлением агглютининов, преципитинов и комплементсвязывающих веществ, антиагрессинов сочетанное действие фагоцитоза с антителами приводит к ликвидации возбудителя.

Клинические признаки. Инкубационный период 2…5, иногда — до 14 дней. Течение болезни может быть молниеносным, острым, подострым, хроническим.

При редко встречающемся молниеносном течении рожи отмечают повышение температуры тела, сильное угнетение животного, слабость сердца. Смерть наступает через несколько часов.

Острое (септицемическое) течение болезни характеризуется быстрым повышением температуры тела до 42°С и выше, отказом от корма, угнетением, слабостью задних конечностей. Свиньи лежат, стараются зарыться в подстилку. Развивается конъюнктивит, появляются признаки острого гастроэнтерита (запор, а к концу болезни понос; иногда рвота). На коже обнаруживают светло-красные пятна разной величины и формы. Позднее эти пятна приобретают темно-багровый цвет. Быстро нарастают слабость сердца, одышка. Кожа живота, подгрудка, конечностей цианотична. Обычно через 2…4 сут животное погибает, если не была оказана лечебная помощь.

При подостром течении болезни (крапивнице) температура тела повышается до 41°С и выше, животное угнетено, аппетит отсутствует, выражена жажда. Через 1…2 сут на коже головы, спины, боков, шеи появляются плотные ограниченные припухлости — сначала бледно-розового, а затем темно-красного цвета, квадратной, прямоугольной, ромбовидной, реже округлой формы. Состояние животных в этот период заметно улучшается. Через 2…4 дня припухлости исчезают. Эпителий пораженных мест кожи омертвевает. В большинстве случаев животные выздоравливают. Однако у ожиревших свиней возможно обострение болезни с летальным исходом. Длительность болезни 7…12 дней.

Хроническое течение болезни наблюдается после перенесенной септицемической рожи или крапивницы. При этом поражается сердце (веррукозный эндокардит). Животные малоподвижны, вялы. Дыхание затруднено, кожа ушей и живота цианотична. Внезапно при явлениях острой сердечной недостаточности может наступить смерть. Иногда развиваются артриты. Пораженные суставы утолщены, болезненны. Животные передвигаются с трудом, хромают. Изредка после крапивницы омертвевают большие участки кожи.

Патологоанатомические изменения. Картина вскрытия трупов, павших при остром и подостром течении рожи, типична для септицемии. Ярко выражена застойная гиперемия всех внутренних органов. В грудной, перикардиальной и брюшной полостях находят серозный экссудат с беловатыми нитями фибрина. Лимфоузлы увеличенные, красноватые, иногда фиолетово-красные. Легкие полнокровные, отечные. В трахее и бронхах — пенистая жидкость. Сосуды сердца переполнены кровью, на эпикарде мелкие кровоизлияния. Селезенка вишнево-красная, несколько увеличенная. Почки темно-вишневые, иногда с кровоизлияниями под капсулой. При хроническом течении рожи на поверхности клапанов сердца можно обнаружить красновато-серые разращения, напоминающие цветную капусту (веррукозный эндокардит).

Диагностика. Бактериологический диагноз включает бактериоскопию, выделение культур и биопробу. В лабораторию направляют кусочки селезенки, печени, почку, трубчатую кость, кусочки кожи (при крапивнице), сердце (при эндокардите), невскрытые суставы (при артритах). Патологический материал консервируют 30…40%-ным глицерином или насыщенным раствором NaCl. Трубчатую кость, очищенную от мышц и сухожилий, обертывают марлей, смоченной 2%-ным раствором карболовой кислоты.

Из свежего патматериала готовят мазки, окрашивают их по Граму и микроскопируют. В мазках обнаруживают грамположительные бактерии, расположенные одиночно и группами, внутри и вне лейкоцитов, а в мазках-отпечатках с поверхности сердечных клапанов при эндокардите — сплетения микробных нитей. Загнивший материал непригоден для бактериоскопии.

Культуры рожистой бактерии выделяют из селезенки, почки, а если материал несвежий, то из мозга трубчатых костей, лимфоузлов, а также из пораженных участков кожи.

Материалом для заражения лабораторных животных (биопроба), которые гибнут через 3…5 дней, служит эмульсия из паренхиматозных органов на стерильном физрастворе. Из загнившего трупа берут кусочки кожи или мозг из трубчатых костей. Заражают в основном голубей, так как в загнившем материале может быть В. murisepticus, патогенный для белых мышей.

Серологическая диагностика. Для выявления хронических и латентных форм рожи используют реакцию агглютинации в двух модификациях: пластинчатый (ускоренный) с сывороткой или цельной кровью исследуемого животного и пробирочный способ с исследуемой сывороткой.

Пластинчатую реакцию ставят на обезжиренном и досуха протертом стекле. Из полученной пробы берут каплю крови (величиной 0,004…0,006 мл) или сыворотки (0,002…0,003 мл), наносят ее на предметное стекло в каплю антигена и перемешивают. Затем стекло с нанесенными каплями (антиген+кровь или сыворотка) держат над спиртовкой, слегка подогревая, кругообразно покачивают. Реакцию учитывают над темным фоном. Положительной реакцией считается образование в течение 1…2 мин от периферии к центру капли макроскопически хорошо заметных мелких или крупных серовато-белого цвета хлопьев или крупинок. При неполном выпадении реакцию считают сомнительной.

В пробирке реакцию ставят с разведением сыворотки 1:50 и 1:100.

Следует учитывать, что агглютинины у свиней появляются на 2…5-й день болезни и сохраняются в крови выздоровевших животных 2…3 недели. После вакцинации свиней РА с диагностической целью можно ставить не ранее чем через 2 месяца, а после прививки противорожистой сыворотки — через 1 месяц.

Для обнаружения рожистых бактерий в патологическом материале, а также для идентификации чистых выделенных культур можно применять метод флуоресцирующих антител.

Биопрепараты. Профилактика рожи свиней осуществляется путем создания активного (вакцинного) или пассивного (сывороточного) иммунитета. Первые живые вакцины против рожи свиней создали Пастер и Тюлье в 1883 г. путем аттенуации (ослабления) рожистой бактерии. На основе принципа Пастера и Тюлье в России Боровский (1896), а затем Конев (1899) получили собственные вакцины. I вакцина Конева была ослаблена пассажированием вирулентной рожистой бактерии через семь кроликов. Эта вакцина не убивала голубей, но вирулентна для мышей. II вакцина Конева была ослаблена пассажированием через четырех кроликов. Матрикс II вакцины убивает молодых голубей и мышей. Вакцины Конева применяли более 30 лет. В 1933…1935 гг. они были модифицированы в ВГНКИ в связи со снижением у них остаточной вирулентности и иммуногенности.

В настоящее время используют несколько вакцин. Депонированная вакцина представляет собой живую культуру матрикса II Конева, адсорбированную на фосфатно-буферном растворе гидрата окиси алюминия.

Живая вакцина из слабовирулентного штамма VR2. Вакцинный штамм VR2 был выделен из трупа свиньи в 1931 г. румынским исследователем В. Виноградником. В процессе многократных пересевов на искусственных питательных средах штамм постепенно ослабил свои первоначальные вирулентные свойства, стал авирулентным для свиней и кроликов и слабовирулентным для белых мышей и голубей.

Иммунитет при вакцинации VR2 наступает через 8…10 дней и сохраняется 4…6 месяцев.

Сухая вакцина ССВР является слабовирулентной культурой вакцинного штамма рожистой бактерии VR2, концентрированная буферной взвесью гидрата окиси алюминия и высушенная с защитной сахарозо-желатиноагаровой средой. Она представляет собой аморфную или мелкозернистую массу беловатого или светло-желтого цвета. При разведении вакцины растворителем образуется опалесцирующая жидкость желтого цвета, содержащая равномерную взвесь рожистых бактерий.

Концентрированная гидроокисьалюминиевая формолвакцина представляет собой адсорбированную на гидрате окиси алюминия и инактивированную формалином культуру возбудителя рожи свиней. Используют ее для предохранительных и вынужденных прививок свиней против заболевания рожей. Вакцинируют только здоровых животных. При наличии в хозяйствах других заразных заболеваний (чума, ящур, болезнь Ауески, инфлюэнца и др.) вакцину прививать нельзя; в этом случае применяют противорожистую сыворотку.

Иммунную противорожистую сыворотку получают путем гипериммунизации свиней, лошадей, волов или овец культурой возбудителя рожи. Ее проверяют на стерильность, безвредность и активность.

Сыворотка, консервированная фенолом или хинозолом, пригодна 4 года. Противорожистую сыворотку применяют с профилактической и лечебной целью. Иммунитет у животных сохраняется от 14 дней до месяца.

Листериоз - болезнь, протекающая с признаками поражения центральной нервной системы, абортами, маститами, септицемией.

Подобно бешенству значение листериоза связано не столько с вызываемыми им хозяйственными потерями, сколько с опасностью заражения человека. Наибольшей опасности подвергаются беременные женщины, их плод и новорожденные, а также лица с ослабленной иммунной системой. Смертность при некоторых формах листериоза, несмотря на активную антибиотикотерапию, достигает 90…100%.

Возбудитель – Listeria monocytogenes - относится по принятому систематическому делению к группе патогенных микроорганизмов рода Listeria.

Морфологические свойства. Листерии являются мелкими полиморфными грамположительными палочками, располагающимися одиночно, парами, реже короткими цепочками. Листерии подвижны. У них обнаруживается длинный полярный жгутик (рис 111, 112).

Рис. 111. Бактериальная Рис. 112.Мазок из чистй культуры

Ширина микроорганизмов колеблется от 0,3 до 0,5 мкм и длина от 0,8 до 2 мкм.

Окраска по Граму свойственна преимущественно молодым культурам. Старые же культуры, по данным многих авторов грамотрицательны или же при окраске становятся неопределёнными.

Культивирование. Листерии - строгие аэробы, спор они не образуют. На МПА L.monocytogenes растёт в виде мелких беловатых с перламутровым оттенком колоний при падающем свете и просвечивающихся, голубоватых - при проходящем свете (рис 113).

Обычно колонии листерий имеют S-форму. Только при длительном культивировании и ослаблении вирулентности появляются R-колонии.

На агаре при pН 5,8 листерии дают жирный слизистый шарик с беловатым оттенком. Желатину они не разжижают. На МПБ микроорганизм растёт первоначально в виде нежного помутнения с лёгкой опалесценцией. В старых культурах он образует вязкий, плотно пристающий ко дну пробирки осадок, который после быстрого вращения пробирки поднимается "косичкой", а при сильном встряхивании разбивается и превращается в равномерную муть.

Основные свойства листерий представлены в таблице 9.

Токсигенность. Листерии выделяют в культуральную жидкость термолабильный гемолизин, который в результате активации его цистеином вызывает гемолиз эритроцитов голубя, кролика, морской свинки, лошади, а также липолитический фактор, вызывающий цитолиз культуры макрофагов. При распаде из микробных клеток освобождается эндотоксин, который и обусловливает характерные изменения у животных и людей.

Антигенная структура. Листерии представлены двумя основными серотипами: «грызунов» и «жвачных». Они имеют соматические О- и жгутиковые Н-антигены. О-антнген содержит 4 термолабильпых (I, II, IV, V) и вариабельный (III) антигены; Н-антиген содержит антигены А, В, С, D.

Патогенез. Листерии в организм проникают различными путями. Наиболее вероятными путями заражения листериоза в естественных условиях являются заражение через слизистую оболочку носовой и ротовой полостей, конъюнктиву, пищеварительный тракт, дыхательные пути и повреждённую кожу.

Как показали многочисленные эксперименты, от способа заражения зависят пути распространения листерий по организму, а также формы течения болезни. Листерии могут обусловить возникновение носительства, развитие местных процессов и сепсиса. Возникновение той или иной формы болезни зависит, с одной стороны от вирулентности микроба, инфицирующей дозы, путей заражения, с другой стороны от возраста животных, беременности, характера кормления и содержания, сопутствующих заболеваний.

Листерии, попавшие в организм животного, обезвреживаются и выводятся из него или получают возможность к размножению и распространению по организму. О путях распространения листерий в организме существует несколько точек зрения.

Кроме нейрогенного пути распространения листерий в организме нельзя исключить возможность распространения лимфогенным и гематогенным путями.

В начале листерии локализуются в лимфатических узлах, где отмечаются сосудистые нарушения, активация клеток мезенхимы. Затем листерии можно уже выделить из крови и паренхиматозных органов; причём в них отмечаются сосудистые нарушения, дистрофические изменения. Начиная с 3 дня после заражения нарушается гематоэнцефалический барьер и листерии проникают в центральную нервную систему.

Основным местом размножения листерий является кровь. Менингоэнцефалит рассматривается как одна из форм проявления листериоза, следующая за септическим процессом.

Ряд данных заставляет считаться и с гематогенным путём распространения возбудителя, а также с латентным пребыванием его в различных органах, в том числе и в мышцах.

У взрослых животных в силу их высокой общей сопротивляемости листериозный сепсис возникает редко, чаще у них поражается ЦНС, а в период беременности - половая система. У молодняка вследствие низкой общей устойчивости развивается сепсис, а затем генерализованный гранулематоз. В некоторых случаях заболевание протекает бессимптомно, при этом животные длительное время остаются носителями листерий.

Листериоз в последние годы причисляют к типичным сапронозам, считая первичным природным очагом листерий почву, оттуда они могут попадать в растительные субстраты. Источником заражения сельскохозяйственных животных служат корма, в частности, силос, где листерии активно размножаются и неопределенно долго существуют.

Заражение людей связано с употреблением в пищу овощей, а также продуктов животноводства. Всё это заставляет предположить возможность существования листерий в организме растений, куда они могут проникать из почвы, однако доказательства этого отсутствуют. Роль грызунов, птиц и других диких животных, как переносчиков листерий, установлена многими исследователями (рис.114). Листерии обнаружены не только у теплокровных животных, но и у амфибий и рыб. По мере изучения этого вопроса значительно возрастает число видов животных и птиц, которые являются листерионосителями. Листерии обнаружены у значительного числа видов насекомых: клещей, блох, вшей, мух. Установлено естественное носительство листерий 8 видами иксодовых клещей, 5 видами блох, 1 видом гамазовых клещей, 1 видом аргасовых клещей и 1 видом вшей.

Инфицированная Резервуар возбудителя Кровососущие

Свободно живущие клещи являются постоянным компонентом природных биоценозов и обитают в тех же экологических средах, в которых обнаружены и листерии.

Исследования показали, что силосная масса плохого качества интенсивно заселена свободно живущими клещами. Гниющая растительность почвы служит клещам одновременно и кормовым субстратом и основной средой их размножения.

Учитывая капрофильность клещей и способность их питаться мышцами трупов животных, изучена их способность воспринимать листерий из среды обитания. В качестве сопутствующей микрофлоры у клещей, обитающих в силосе, выделены дрожжи, плесневые грибы, актиномицеты и спорообразующие аэробы.

Клинические признаки. Инкубационный период 7…30 дней. Течение болезни острое, подострое, хроническое. Болезнь проявляется в нескольких клинических формах: нервной, септецемической, смешанной, стертой, бессимптомной, а так же с поражением половой системы и молочной железы.

У крупного рогатого скота чаще поражается центральная нервная система. Заболевание начинается угнетением, вялостью, снижением аппетита, необычным поведением. Через 1…7 дней отмечают некоординированные, иногда круговые движения, потерю равновесия, судороги, иногда приступы буйства, парезы отдельных групп мышц, искривление шеи, потерю зрения, конъюнктивит, стоматиты, оглумоподобное состояние. Температура тела повышена в начале болезни или остается в пределах нормы. Длительность болезни до 10 дней. Другая форма – поражение половой системы – проявляется абортами, задержанием последа и метритами. На почве листериоза может возникнуть мастит, сопровождающийся длительным выделением возбудителя с молоком.

У телят и ягнят листериоз протекает в виде септицемии (понос, лихорадка), в отдельных случаях – с поражением центральной нервной системы.

У взрослых свиней отмечают исхудание, анемию, снижение аппетита, нарушение координации движений, кашель абсцессы в различных органах и тканях. У поросят поражается центральная нервная система: расстройство координации движений, своеобразная «ходульная» походка, манежные движения, мышечная дрожь, приступы судорог, возбуждение. Температура тела в начальный период заболевания повышена, а затем снижается. При септицемической форме болезни отмечают угнетение, отказ от корма, слабость, затрудненное дыхание, посинение кожи в области ушей и живота, иногда – признаки катарального энтерита. Температура тела повышена. Длительность болезни до 3-х суток.

У птиц листериоз проявляется септицемически. Заболевают цыплята и молодые куры. Они теряют аппетит, становятся малоподвижными; наблюдаются конъюнктивиты, учащенное дыхание, прогрессирующая слабость, судороги, параличи; гибель наступает через 3…5 дней.

Патологоанатомические изменения. При нервной форме болезни обнаруживают инъекцию сосудов и отек мозга, кровоизлияния в мозговой ткани и в отдельных внутренних органах. При гистологическом исследовании отмечают менингоэнцефалит. При септицемической форме регистрируют гиперемию или отек легких, катар слизистых оболочек пищеварительного тракта, кровоизлияния в сердечной мышце и в паренхиматозных органах, увелечение селезенки, дегенеративные изменения и некротические очаги в печени, селезенке, почках, миокарде; увеличение лимфатических узлов. При поражении половых органов у самок обнаруживают эндометрит или метрит.

Диагностика. Лабораторная диагностика листериоза осуществляется, как правило, бактериологическим и серологическим методами.

Для бактериологического исследования посылают свежий труп мелкого животного или паренхиматозные органы и голову, от трупов крупных животных (лошадь, крупный рогатый, скот, овца) — головной мозг и кусочки паренхиматозных органов, а в случае аборта — абортированный плод или его органы; при наличии мастита — пробы молока из пораженных долей вымени.

Бактериологическое исследование включает обычную микроскопию препаратов-отпечатков, окрашенных по Граму, и люминесцентную микроскопию с применением флюоресцирующей сыворотки. Посевы для выделения культуры производят из всех присланных тканей н органов на МПА, МПБ, МППБ, МППА с 1% глюкозы и 2... 3% глицерина, переваром Мартена. Заражают морских свинок, белых мышей, голубей.

Биопроба. К листериозу восприимчивы белые мыши (массой не менее 18,0 г), морские свинки и голуби. Заражают их подкожно выделенной культурой или взвесью растертой ткани органов, присланных в лабораторию. Однако у морских свинок для заражения часто пользуются конъюнктивальной пробой: на конъюнктиву глаза наносят две капли испытуемой культуры, затем слегка массируют веки ватным тампоном. Вирулентные штаммы листерий на 2…4-й день вызывают гнойный кератоконъюнктивит. При подкожном заражении инъецируют суспензию тканей органов в дозе 0,3... 0,5 мл. Обязательно используют суспензию головного мозга. При положительной биопробе животные гибнут через 2... 6 суток. Для повышения эффективности биопробы белым мышам за 2... 3 ч до заражения внутри-брюшинно в дозе 5 мг вводят кортизон. При вскрытии обнаруживают множественные некротические очажки в печени, селезенке, почках. Срок наблюдения за зараженными животными — 8 суток (если не погибнут раньше).

Паренхиматозные органы павших животных исследуют бактериологически. Выделенную чистую культуру идентифицируют. Для идентификации культуры используют также серологический метод — РА на стекле со специфической антилистериозной сывороткой в разведении 1: 50. Серотип идентифицируется при использовании типовых сывороток. Видовую принадлежность возбудителя устанавливают также просматриванием препаратов-мазков из культуры или непосредственно из патологического материала, обработанных флюоресцирующей специфической сывороткой.

Для серологической диагностики направляемые в лабораторию пробы крови (или сыворотки) от животных из хозяйств со специфическим антигеном исследуют методом РСК.

Биопрепараты. Сухая живая вакцина против листериоза сельскохозяйственных животных из штамма АУФ представляет собой культуру лиофильно высушенного аттенуированного штамма листерий первого серотипа. Вакцину контролируют на чистоту роста, безвредность и иммуногенность (на кроликах). Листериозные диагностические агглютинирующие сыворотки. Листериозные флюоресцирующие сыворотки. Разработана вакцина из двух серотипов листерий.

Синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa) — основной возбудитель инфекционных поражений, вызываемых псевдомонадами. Синегнойную палочку впервые описал А. Люккё (1862), чистую культуру бактерий выделил П. Жессар (1882). Она отнесена к семейству Pseudomonadaceae, роду Pseudomonas. Начиная с 70-х годов P. aeruginosa — один из основных возбудителей локальных и системных гнойно-воспалительных процессов.

P. aeruginosa распространена повсеместно; её выделяют из почвы, воды, растений и животных (водных или обитающих в ареалах).

Морфологические и тинкториальные свойства. Средние размеры синегнойной палочки 1…3x0,5…1 мкм; в нативных препаратах бактерии подвижны (имеют один или два полярных жгутика). В мазках чистых культур палочки расположены одиночно, попарно либо в виде коротких цепочек. В мазках из патологического материала их чаще можно обнаружить в цитоплазме лимфоцитов, при этом палочки могут деформироваться. Поверхность бактерий покрыта микроворсинками; кроме того, P. aeruginosa синтезирует слизистое вещество, покрывающее тонким слоем микробную клетку. Более вирулентные, так называемые мукоидные штаммы, секретируют это вещество наиболее интенсивно, что даёт основание рассматривать слизь как фактор патогенности.

Культивирование. Синегнойная палочка растёт в широком диапазоне температур (4…42 °С), что указывает на способность длительно сохраняться в окружающей среде и противостоять защитному действию повышения температуры тела. Отличительная особенность микроорганизма — ограниченная потребность в питательных веществах, обеспечивающая сохранение жизнеспособности в условиях почти полного отсутствия источников питания. Микроорганизм хорошо растёт на простых питательных средах в аэробных условиях при температуре 30…37 °С, а также и при 42 °С, что можно использовать как дифференциально-диагностический признак. Образование слизи — характерная особенность вирулентных штаммов; слизь придает вязкость бульонным культурам и колониям.

В жидких средах синегнойная палочка образует характерную серовато-серебристую плёнку; по мере старения культуры возникает помутнение среды по направлению сверху вниз. На плотных средах обычно образует небольшие (2…5 мм) выпуклые S-колонии. Бактерии также могут формировать плоские, неправильной формы колонии с волнистыми краями либо складчатые колонии с неровной поверхностью («маргаритки»). На плотных средах у многих штаммов синегнойной палочки наблюдают феномен радужного лизиса — появление на поверхности колоний плёнки, переливающейся всеми цветами радуги в отражённом свете. Феномен радужного лизиса обусловлен спонтанным действием бактериофага и характерен только для P. aeruginosa (его можно рассматривать как дополнительный таксономический признак). Синегнойная палочка не ферментирует лактозу и образует на среде Плоскирева небольшие беловатые полупрозрачные колонии.

Биохимические свойства. P. aeruginosa — выраженный хемоорганотроф и строгий аэроб. Палочка способна расти на чисто минеральных средах при добавлении подходящего единственного источника углерода. Характерная особенность — образование триметиламина, придающего культурам запах жасмина или карамели, Как и большинство патогенных гноеродных бактерий, синегнойная палочка каталазаположительна. Подобно прочим аэробам она синтезирует цитохромоксидазу (индолфенолоксидаза), а оксидазный тест служит одним из ведущих при идентификации бактерий.

Протеолитическая активность высокая: бактерии разжижают желатину, свёртывают сыворотку крови, гидролизуют казеин; утилизируют гемоглобин (большинство патогенных штаммов на КА образует зону b-гемолиза). Микроорганизмы расщепляют не только белки, но и отдельные аминокислоты (например, валин и аланин).

Сахаролитическая активность низкая: бактерии способны окислять только глюкозу с образованием глюконовой кислоты.

Ввиду явного преобладания протеолитических свойств над сахаролитической активностью к идентификации синегнойной палочки среды «пёстрого ряда» готовят с малым содержанием пептона (до 0,1%) и высокой концентрацией углеводов (до 2%).

Большинство штаммов продуцирует пигмент пиоцианин, который имеет синий цвет в нейтральной или щелочной и красный в кислой среде. Имеются штаммы, которые образуют темно-красный пигмент.

Токсигенность. P. aeruginosa образует комплекс экзотоксинов, а также эндотоксин, высвобождающийся при гибели бактерий.

Экзотоксины представлены метаболитами с широким спектром биологической активности; из них основное значение имеют следующие экзотоксины.

Экзотоксин А — термолабильный белок, самый токсичный из всех остальных продуктов жизнедеятельности синегнойной палочки. Механизм действия связан с подавлением синтеза белков через АТФ-рибозилирование и нарушением организации матрицы синтеза. То есть во многом аналогичен действию дифтерийного токсина. Действие экзотоксина А проявляется в токсическом эффекте, отёках, некрозах, артериальной гипотензии с последующим сом, метаболическом ацидозе, дыхательной недостаточности и т.д.

Что способствует осуществлению желаний? Стопроцентная, непоколебимая уверенность в своем...

Что будет с Землей, если ось ее сместится на 6666 км? Что будет с Землей? - задался я вопросом...

Что делает отдел по эксплуатации и сопровождению ИС? Отвечает за сохранность данных (расписания копирования, копирование и пр.)...

Конфликты в семейной жизни. Как это изменить? Редкий брак и взаимоотношения существуют без конфликтов и напряженности. Через это проходят все...

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте: